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NEWS基质胶应用技巧揭秘 - 不朽情缘MG助力生物医疗
来源:安锦紫 日期:2025-07-28基质胶在生物医疗研究中常被视为3D细胞培养、类器官、肿瘤研究、细胞侵袭及血管生成等实验的“支架”。然而,从解冻到培养板上铺设,从浓度选择到结果判读,稍有不慎可能会导致实验失败。基于数千次实验反馈,不朽情缘MG 整理了这一“避坑指南”,帮助您快速上手,获取可靠的实验数据。
一旦收到货品,不朽情缘MG 建议将产品存放于-20℃环境中;若需短时间放置,可以在4℃环境下存放不超过7天。关于反复冻融,建议尽量避免;首次融化后应立即分装(200µL/管),并重新放回-20℃保存。
冷冻状态的基质胶可以在操作前一天放置于碎冰中,随后转移至4℃冰箱,次日即可使用。适当延长4℃下的融化时间可以有效减少基质胶中的气泡。
在实验应用中,用户可以选择含酚红或无酚红的基质胶。含酚红的产品适用于常规实验,由于温度与pH变化,液体颜色在明黄色至暗红色之间会有差异。而在进行颜色敏感实验时,推荐使用无酚红基质胶。此外,酚红是一种潜在的内分泌干扰物,可能影响实验动物体内的激素产生与代谢能力。
关于标准浓度,推荐的蛋白浓度为8-12mg/mL,适合Transwell实验和皮下成瘤实验;高浓度蛋白浓度范围为18-22mg/mL,适用于较难成瘤的细胞系,培养时凝胶可保持3-5分钟。
如果成瘤不成功,可能的原因包括细胞未处于对数生长期,最佳细胞密度为80-90%;小鼠选择上,建议使用4-6周龄的裸鼠,小于4周可能不耐受,大于6周免疫力增强,不易成瘤。如有免疫排斥现象,可考虑更换免疫缺陷程度更高的小鼠。此外,在接种后一周可补种一次,以提高成功率。
出现此情况可以是由于炎症反应,导致肿瘤细胞被小鼠自身吸收。如后续肿瘤仍未长出,可考虑更换小鼠以降低免疫缺陷程度。
若细胞不能形成连续的网格状结构,建议使用3-5代且融合度为70%-80%的HUVEC细胞,且确保细胞数量充足。通常在4-18小时内可观察到血管生成,建议每4小时进行一次观察。
如果细胞不转移,可能是细胞活性不足。使用胰酶消化后也必须清除培养基中的血清,以提高实验成功率。
关于类器官的传代,标准时间为7-14天,直径约100-200um时可以进行传代。对于生长较慢的类器官,可能需要数周。鉴定类器官的方法通过显微镜观察和H&E染色观察其形态;可进一步使用免疫荧光检测类器官表达相应生物标志物。
了解决定类器官形态的因素至关重要,包括样本来源及细胞因子的品质差异,这些都可能影响最终类器官的形态。
以下为不朽情缘MG的基质胶及相关商品信息:
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