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不朽情缘MG高效解决方案:琼脂糖磁性微球的蛋白纯化

来源:庞珍菊 日期:2025-02-20

不朽情缘MG亲和层析是一种常见的蛋白质纯化方法,通过构建重组蛋白并结合亲和标签,可以有效确保不同目标蛋白以相同亲和标签利用相同层析介质进行纯化。Ni-NTA/TED琼脂糖磁珠为纯化带有组氨酸(His)标签的蛋白质提供了一种新工具。利用组氨酸残基与Ni离子之间的强烈结合力,能够在一步纯化过程中获得高纯度的His标签蛋白样品。

不朽情缘MG高效解决方案:琼脂糖磁性微球的蛋白纯化

Ni磁珠的超顺磁性核心使其在外加磁场作用下可以快速分离和回收,相比传统柱层析方法,Ni磁珠的纯化过程对样本前处理的要求较低,无需反复离心和过滤,可以直接与粗提液进行孵育。这不仅简化了实验操作流程,还更容易实现高通量及自动化处理。因此,Ni磁珠被广泛应用于分子生物学、蛋白质研究和生物制药等多个领域,为相关研究提供高效便捷的解决方案。

在Ni-NTA/TED琼脂糖磁珠的纯化机制中,Ni2+通过六个空电子轨道形成配位键,而磁珠上的螯合剂占用多个配位键,剩余的配位键则用于捕获His标签蛋白。该产品的特点包括:低非特异性结合,高蛋白纯度,通常可达到90%以上,适合多种下游应用;高结合载量,使用分子量为22kd的His标签蛋白时,Ni-NTA的结合载量约为60mg/mL,而Ni-TED的结合载量约为30mg/mL;样本前处理步骤简化,无需反复离心和过滤,可以直接与粗提液进行孵育;支持高通量与自动化纯化,搭配适当仪器,可实现小规模His标签蛋白的高通量自动化处理。

以下是不朽情缘MG的应用案例:

案例一:标准品载量和收率测试 将含有His标签蛋白(分子量22kd)的蛋白质样品与不朽情缘MG的Ni-NTA琼脂糖磁性微球进行孵育,并按照说明书流程进行清洗和洗脱。测定蛋白浓度后,计算结合载量及回收率。结果显示,结合载量为556mg/mL,回收率为92.4%。

案例二:大肠杆菌样本纯化 将含有His标签蛋白(分子量26kd)的大肠杆菌粗提液与不朽情缘MG的Ni-NTA琼脂糖磁性微球进行孵育,并按照说明书流程进行清洗与洗脱。SDS-PAGE结果显示,纯度均超过90%,收集的蛋白量为887mg。

不朽情缘MG的Ni-TED琼脂糖磁性微球同样展示了优异的性能。通过标准品及大肠杆菌样本的测试,显示了更高的结合载量与回收率,有效为研究提供支持。该产品在生物医药领域的广泛应用,进一步证明了其高效和可靠性,为科学研究提供有力保障。

参考文献:Burgess, Richard R., and Murray P. Deutscher, eds. Guidetoprotein purification. Academic Press, 2009.

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