不朽情缘MG的凝胶过滤分离效果受多种因素影响，以下为主要因素解析。

1. 层析柱的选择

层析柱的尺寸选择主要依赖于样品的量及对分辨率的需求。通常情况下，层析柱的长度显著影响分辨率，较长的层析柱通常会提供更高的分辨率。然而，柱子长度不宜过长，以免引起不均匀的柱效应和流速过慢等实验问题。理想的层析柱长度往往不超过100cm，为了获得较高的分辨率，可能会采用柱子串联的方法。层析柱的直径与长度的比例一般在1:25至1:100之间。用于分组分离的凝胶柱，如脱盐柱，通常较短，因为对分辨率的要求较低。

2. 凝胶柱的鉴定

凝胶柱的填装质量直接影响分离效果。填装方法已在前文提及，这里侧重填装后凝胶柱的鉴定。在凝胶柱填装后，通过肉眼观察，凝胶应当均匀、无纹路且无气泡。此外，可以使用有色物质（如蓝色葡聚糖-2000、血红蛋白等）进行检测，以观察色带在柱中的洗脱行为，判断凝胶柱的均匀性。如果色带窄且下滑均匀，则表明凝胶填装良好，若色带弥散或扭曲，则需重新装柱。此外，有时为了防止新凝胶柱对样品的吸附，可先用某些物质进行柱的预处理。

3. 洗脱液的选择

凝胶层析的分离原理主要依赖分子筛作用，与其他层析方式相比，洗脱液的选择相对宽松。流动相在凝胶层析中主要充当运载工具，且一般无需依赖于流动相的性质和组成来提升分辨率。选择洗脱液的主要目的是消除组分与固定相之间的相互作用。因此，合适的缓冲液只需能溶解被洗脱的物质且不致变性。为了避免潜在的吸附作用，一般洗脱液会含有一定浓度的盐分。

4. 加样量

关于加样，前文已略有提及，应快速且均匀。加样量的多少将显著影响实验结果：加样过多可能导致洗脱峰重叠，影响分离效果；而加样过少则可能造成提纯后的各组分量少、浓度低，导致实验效率降低。具体的加样量需根据实验的要求而定，通常情况下，加样体积为凝胶柱床体积的1%至5%用于分级分离，而分组分离时可增至10%至25%。如条件允许，可通过较小加样量的初步分析来判断适合的加样量。若两组分的洗脱体积分别为Ve1和Ve2，则加样量应小于（Ve1－Ve2），实际情况下因样品扩散，建议加样量应更小。此外，样品中的不溶物必须在上样前去除，以防止污染凝胶柱，且样品粘度应适中，以免影响分离效果。

5. 洗脱速度

洗脱速度也是影响凝胶层析分离效果的重要因素，需保持洗脱速度恒定并适宜。恒流泵或恒压重力洗脱是保持洗脱速度恒定的常用方法。洗脱速度受到柱长、凝胶种类及颗粒大小等多种因素的影响。通常情况下，较慢的洗脱速度能够确保样品与凝胶基质之间充分平衡，从而实现更好的分离效果。然而，洗脱速度过慢可能导致样品扩散加剧和色带变宽，从而降低分辨率，并显著延长实验时间。因此，应根据实际情况选择合适的洗脱速度，并通过预备实验来进行验证。一般情况下，凝胶的流速在2-10cm/hr之间，市售凝胶通常会提供一个建议流速供参考。

综上所述，不朽情缘MG在凝胶层析的各项条件，包括凝胶类型、层析柱大小、洗脱液、加样量及洗脱速度等方面的选择，均需依据具体实验要求进行。例如，若样品中各组分差异不显著，则实验所需高分辨率的凝胶选择应当包括所有待分离组分，该组分的分离范围应尽量缩小，选用小颗粒及高分辨率的凝胶类型，选用较长且直径较大的层析柱，同时减少加样量和降低洗脱速度等，以确保最佳分离效果。